Number of the records: 1
Determinácia účinkov bazy čiernej (Sambucus nigra L.) na humánnu líniu buniek vaječníkov HGL5
Title Determinácia účinkov bazy čiernej (Sambucus nigra L.) na humánnu líniu buniek vaječníkov HGL5 = [determination of the effects of black elder (Sambucus nigra) on the human ovarian cell line HGL5] / Marek Bandík ; školiteľ Adriana Kolesárová Author-s Bandík, Marek, ; SPUFBP30 (Author)
Kolesárová, Adriana, ; SPUFBP30 (Thesis advisor)Corporation Slovenská poľnohospodárska univerzita (Nitra, Slovensko). Fakulta biotechnológie a potravinárstva. Ústav aplikovanej biológie Published 2022 Description 132 s. : ilustr., príl., tab. 30 cm Notes V práci uvedený projekt - AgroBioTech ITMS 26220220180 ; APVV-18-0312, DS-FR-19-0049, VEGA 1/0266/20, KEGA 011SPU-4/2016. Na titulnej strane uvedený preklep rok 2020 . Bibliografia s. 84-110 . Resumé anglicky, slovensky . Doktorandská dizertačná práca (PhD.). - Ústav aplikovanej biológie FBP SPU v Nitre Subject-s rastlinné polyfenoly antioxidačná aktivita baza čierna ovariálne bunky životaschopnosť rastové faktory in vitro biotechnológie dizertácie Annotation Autorský abstrakt: Baza čierna (Sambucus nigra L.) je široko uznávaná pre svoje zdravie podporujúce vlastnosti. Polyfenoly, ako sú flavonoly, fenolové kyseliny, antokyány a flavonoidy, obsiahnuté v zrelých plodoch a kvetoch bazy, vykazujú široké spektrum prospešných účinkov na ľudský organizmus, vrátane antioxidačných, antibakteriálnych a protinádorových vlastností. Reprodukčná sústava je jednou z kľúčových sústav živého organizmu, a preto jej správne fungovanie a regulácia ovariálnych funkcií je veľmi dôležitá. Cieľom našej štúdie bolo stanoviť obsah polyfenolov v extraktoch a skúmať účinok extraktov z bazových kvetov a plodov v rôznych koncentráciách (12,5; 25; 50; 100; 200 µg. ml-1 počas 24 hodín) na humánnu líniu buniek stratum granulosum HGL5. V tejto in vitro štúdii sme skúmali životaschopnosť buniek HGL5, ktorá bola hodnotená testom životaschopnosti buniek AlamarBlueTM. Sekrécia steroidných hormónov (17β-estradiol a progesterón) granulóznymi bunkami, prítomnosť steroidných receptorov (ER-α, PR), ako aj sekrécia rastových faktorov (TGF-β2, EGF, IGF-I) a prítomnosť ich receptorov (TGFβR2, EGFR, IGF1R) v bunkách HGL5 bola detegovaná použitím metódy ELISA. Chemická analýza polyfenolov prítomných v extraktoch bola uskutočnená kvalitatívnym a kvantitatívnym skríningom pomocou HPLC-DAD analýzy, celkový obsah polyfenolov bol vyhodnotený použitím Folin-Ciocalteau činidla a celkový antioxidačný potenciál rastlinných extraktov bol determinovaný DPPH metódou. Výsledky skríningu polyfenolov preukázali, že kvety a plody bazy čiernej sú bohatým zdrojom polyfenolov a najvýznamnejšou zlúčeninou, ktorá sa vyskytovala v oboch extraktoch bazy, bol flavonoid rutín. Celkový obsah polyfenolov predstavoval 77,89 mg GAE.g-1 kvetov bazy a 78,91 GAE.g-1 plodov bazy. Celková antioxidačná kapacita bola stanovená na 90,00 mg TEAC.g-1 kvetov bazy a 87,52 mg TEAC.g-1 plodov bazy. Naše výsledky neukázali významný vplyv na viabilitu buniek HGL5 po aplikácii extraktov. Aplikácia oboch extraktov bazy čiernej mala dávkovo-závislý účinok na sekrečnú aktivitu granulóznych buniek, ale neovplyvnila prítomnosť steroidných receptorov ER-α a PR. Extrakt kvetov v koncentrácii 50 µg.ml-1 (P≤0,01) a extrakt plodov v koncentrácii 100 µg.ml-1 (P≤0,05) zvyšovali úroveň 17β-estradiolu. Sekrécia progesterónu bola zvýšená v najnižšej použitej koncentrácii oboch extraktov bazy (12,5 µg.ml-1; P≤0,05). Aplikácia extraktov bazy čiernej nemala vplyv na transformačný rastový faktor ß2 (TGF-ß2), ani na jeho intracelulárny receptor TGFβR2. Extrakt z kvetov bazy neovplyvnil sekréciu epidermálneho rastového faktora (EGF), ale v koncentrácii 200 μg.ml-1 signifikantne (P≤0,05) zvýšil množstvo nameraných koncentrácií receptora EGFR. Na druhej strane, extrakt z plodov bazy (200 μg.ml-1; P≤0,05) signifikantne zvýšil sekréciu EGF extraktu v bunkách HGL5, ale štatisticky preukazne neovplyvnil prítomnosť EGFR. Extrakt z kvetov bazy neovplyvnil sekréciu inzulínu podobného rastového faktoru I (IGF-I) v žiadnej z použitých koncentrácií, ale spôsobil signifikantný (P≤0,05) pokles úrovne receptora IGF1R pri koncentrácii 100 a 200 μg.ml-1. V prípade extraktu z plodov bazy sme pozorovali signifikantné (P≤0,01) zvýšenie sekrécie IGF-I pri koncentrácii 200 μg.ml-1 a mierne zvýšenie v množstve IGF1R v koncentrácii 12,5 μg.ml-1 (P≥0,05). Naše výsledky ukázali, že oba extrakty vykazovali silný antioxidačný charakter na ovariálne bunky HGL5. Bola nameraná signifikantne nižšia úroveň ROS po aplikácii extraktu z kvetov bazy v koncentráciách 25 μg.ml-1 (P≤0,01), 50 μg.ml-1 (P≤0,01), 100 μg.ml-1 (P≤0,001) a 200 μg.ml-1 (P≤0,0001). Podobné trend, ktorý viedol k signifikantne nižšej úrovni ROS, sme zaznamenali aj po aplikácii extraktu z plodov bazy v koncentráciách 100 μg.ml-1 (P≤0,01) a 200 μg.ml-1 (P≤0,001). Na záver, výsledky našich experimentov naznačujú zdraviu prospešný potenciál bazy čiernej, možný modulačný účinok kvetov a plodov bazy na steroidogenézu, účinok na rast buniek reguláciou rastových faktorov a silný antioxidačný účinok inhibíciou produkcie ROS v ovariálnych granulóznych bunkách in vitro, čo v konečnom dôsledku môže priaznivo ovplyvniť plodnosť a reprodukčné zdravie žien Author’s abstract: Black elder (Sambucus nigra L.) has been widely recognized for its health-promoting properties. Polyphenols such as flavonols, phenolic acids, anthocyanins, and flavonoids, contained in ripe fruits and flowers of the elderberry, show a wide range of beneficial effects on the human body, including antioxidant, antibacterial and antitumor properties. The reproductive system is one of the key systems of a living organism and its proper functioning and regulation of ovarian functions are very important. The aim of our study was to determine the content of polyphenols in the elderberries extracts and to investigate the effect of extracts from elderflowers and elderberries at different concentrations (12.5; 25; 50; 100; 200 µg.ml-1 for 24 hours) on the human ovarian granulosa cell line HGL5. In this in vitro study, the viability of HGL5 cells was determined by the AlamarBlueTM cell viability assay. Secretion of steroid hormones (17β-estradiol and progesterone) by granulosa cells, the presence of steroid receptors (ER-α, PR), as well as the secretion of growth factors (TGF-β2, EGF, IGF-I), and the presence of their receptors (TGFβR2, EGFR, IGF1R) in HGL5 cells was detected by ELISA method. Chemical analysis of polyphenols, present in the elderberry extracts, was performed by qualitative and quantitative screening using HPLC-DAD analysis, total polyphenolic content was evaluated using Folin-Ciocalteau reagent, and total antioxidant potential of plant extracts was determined by the DPPH method. The results of polyphenol screening showed that the elderflowers extract and elderberry fruit extract are rich sources of polyphenols and the most important compound found in both extracts was the flavonoid rutin. The total polyphenol content was 77.89 mg GAE.g-1 elderflowers and 78.91 GAE.g-1 elderberries. The total antioxidant capacity was determined to be 90.00 mg TEAC.g-1 elderflower and 87.52 mg TEAC.g-1 elderberries. Our results did not show a significant effect on the viability of HGL5 cells after the application of the elderberries extracts. The application of both extracts had a dose-dependent effect on the secretory activity of the granulosa cells but did not affect the presence of steroid receptors ER-α and PR. The elderflower extract at a concentration of 50 µg.ml-1 (P≤0.01) and the elderberry fruit extract at a concentration of 100 µg.ml-1 (P≤0.05) increased the 17β-estradiol levels. Progesterone secretion in the lowest used concentration of both extracts of black elder (12.5 µg.ml-1; P≤0.05) was increased. The application of extracts did not affect transforming growth factor β2 (TGF-β2), nor its intracellular receptor TGFβR2. The elderflower extract did not affect the secretion of epidermal growth factor (EGF), but it significantly (P≤0.05) increased the level of measured concentrations of receptor EGFR at the concentration of 200 µg.ml-1. On the other hand, elderberry fruit extract (200 µg.ml-1; P≤0.05) significantly increased EGF secretion in HGL5 cells, but it did not statistically significantly affect the presence of EGFR. The elderflower extract did not affect the secretion of insulin-like growth factor I (IGF-I) at any of the concentrations used but caused a significant (P≤0.05) decrease in IGF1R levels at 100 and 200 µg.ml-1. In the case of extract from elderberries, we observed a significant (P≤0.01) increase in IGF-I secretion at a concentration of 200 µg.ml-1 and a slight increase in the level of measured IGF1R at a concentration of 12.5 µg.ml-1 (P≥0.05). Our results showed that both extracts possessed a strong antioxidant character on ovarian granulosa cells HGL5. Significantly lower ROS levels were measured after the application of elderflower extract in concentrations of 25 µg.ml-1 (P≤0.01), 50 µg.ml-1 (P≤0.01), 100 µg.ml-1 (P≤0.001) and 200 µg.ml-1 (P≤0.0001). Similarly, we observed a similar trend, which led to significantly lower levels of ROS, even after the application of elderberry fruit extract in concentrations of 100 µg.ml-1 (P≤0.01) and 200 µg.ml-1 (P≤0.001). In conclusion, the results of our experiments suggest the health-promoting potential of black elder, the possible modulatory effect of elderflowers and elderberries on steroidogenesis, the effect on cell growth by regulating growth factors, and the strong antioxidant effect by inhibiting ROS production in ovarian granulosa cell in vitro, which may ultimately affect fertility and female reproductive health Country Slovakia Language Slovak URL http://opac.crzp.sk/openURL?crzpSigla=spunitra&crzpID=32410 Copies 1, available for regular loan 0, in-library use only 1 Database Graduate theses 
book
Call number Dislocation Collection in study room Available VP-97746 Štúrova - záverečné práce in-library use only
Number of the records: 1