Zdroj: Slovenská poľnohospodárska knižnica - Katalóg
Počet záznamov: 1
Determinácia biologickej aktivity rastlinných silíc v humánnej bunkovej línii MDA-MB-231
Názvové údaje Determinácia biologickej aktivity rastlinných silíc v humánnej bunkovej línii MDA-MB-231 = [Determination of the biological activity of essential oils in the MDA-MB-231 human cell line] / Petra Borotová ; vedúci záverečnej práce Eva Tvrdá Autor-i Borotová, Petra, ; SPUPRA15 (aut.)
Tvrdá, Eva, ; SPUFBP31 (škol.)Korporácia Slovenská poľnohospodárska univerzita (Nitra, Slovensko). Fakulta biotechnológie a potravinárstva. Ústav biotechnológie Vyd.údaje 2025 Rozsah 135 s. : grafy, ilustr., tab. ; 30 cm Poznámky V práci uvedený projekt - APVV-21-0095 a projekt APVV-20-0058. Súbežný názov prevzatý z databázy uis SPU . Bibliografia s. 104-135 . Resumé anglicky, slovensky . Doktorandská dizertačná práca (PhD.).- Ústav biotechnológie FBP SPU v Nitre Predmet vôňovec citrónový vavrín kubébový gaultéria silice chemické zloženie biologicky aktívne látky antimikrobiálne látky antioxidačná aktivita nádorové bunky rakovina prsníkov protinádorová terapia dizertácie Anotácia Autorský abstrakt: Rastlinné silice sú prchavé sekundárne metabolity produkované rôznymi rastlinami, ktoré sú zložené prevažne z terpenoidov a fenylpropanoidov. Vykazujú širokú škálu biologických účinkov vrátane antioxidačnej, antimikrobiálnej a cytotoxickej aktivity. Cieľom dizertačnej práce bolo preskúmanie biologických vlastností zvolených rastlinných silíc. V prvom kroku bolo 10 silíc podrobených analýzam chemického zloženia pomocou plynovej chromatografie a hmotnostnej spektrometrie. Analýza antioxidačnej aktivity prebehla pomocou DPPH metódy. Antimikrobiálna aktivita bola stanovená diskovou difúznou metódou a bujónovým dilučným testom. Následne boli na základe najlepších účinkov vybrané 3 silice, u ktorých bola skúmaná ich protinádorová aktivita pri koncentráciách 0,3; 3 a 30 μg.ml-1 silice (24- a 48-hodinová inkubácia) a s použitím nádorových buniek prsníka MDA-MB-231 in vitro. Bunková viabilita bola stanovená pomocou MTT testu. Membránová integrita bola sledovaná pomocou CFDA/PI farbenia, mitochondriálny membránový potenciál bol vyhodnotený pomocou PI farbenia a fragmentácia DNA bola stanovená pomocou TUNEL metódy. Reaktívne formy kyslíka boli zistené luminometricky a pomocou NBT (superoxidový radikál), Amplex® Red kitu (peroxid vodíka) a APF kitu (hydroxylový radikál). Oxidatívne poškodenie lipidov bolo vyhodnotené pomocou stanovenia prítomnosti malondialdehydu a pomocou kvantifikácie proteínových karbonylov. Následne bola pomocou Western blotu detegovaná hladina proteínov p53, BAX a Bcl-2. Výsledky boli vyhodnotené štatisticky pomocou programu GraphPad Prism, pričom bol vykonaný Shapiro-Wilkov test a dvojfaktorová analýza variancie (ANOVA). Hlavné zložky, ktoré sa nachádzali v siliciach, boli linalylacetát a limonén (bergamotová), δ-kadinén a (Z) β farnezén (cédrová), terpinén-4-ol a γ terpinén (čajovníková), 1,8-cineol a limonén (gáfrovníková), metylsalicylát (gaultériová), β-citronelol a geraniol (geraniová), citral (lemongrasová a litsea cubeba), 1,8 cineol a α terpineol (niaouli) a linalylacetát (petitgrain). Najvyššiu antioxidačnú aktivitu dosahovali silice lemongrasová (84,0 %) a cédrová (81,1 %). Výraznú antimikrobiálnu aktivitu proti G- negatívnej baktérii Pseudomonas aeruginosa vykazovali silice lemongrasová a litsea (inhibičné zóny 34,67 a 30,00 mm respektíve). Salmonella enterica bola citlivá voči siliciam pomocou bujónovej dilučnej metódy. Inhibíciu voči G+ baktériám vykazovala najviac gaultériová silica s inhibičnými zónami 12,67 a 11,67 mm (Staphylococcus aureus a Bacillus subtilis). Voči kvasinkám boli najúčinnejšie čajovníková, geraniová a gaultériová silica s MIC nižšou ako 1 μl.ml-1. Spomedzi kvasiniek bola najviac inhibovaná Candida krusei so zónami inhibície 30,00 mm (litsea), 20,00 mm (cédrová) a 19,96 mm (lemongrasová). Na základe týchto vlastností boli zvolené 3 silice – gaultériová, lemongrasová a litsea, u ktorých boli skúmané protinádorové vlastnosti. Analýza bunkovej viability ukázala, že najvýraznejší vplyv mala gaultériová silica (p<0,0001) pri koncentrácii 3 μg.ml-1 (po 24 hodinách) a 0,3 μg.ml-1 (po 48 hodinách). Membránová integrita bola narušená po pridaní lemongrasovej a litsea silice už pri koncentrácii 0,3 μg.ml-1 v oboch testovaných časoch (p<0,0001). Mitochondriálny membránový potenciál bol najviac ovplyvnený gaultériovou (3 μg.ml-1 v oboch časoch) a litsea silicou (3 μg.ml-1 po 24 hodinách a 0,3 μg.ml-1 po 48 hodinách). DNA intaktnosť bola narušená predovšetkým pôsobením litsea silice (30 μg.ml-1 po 24 aj 48 hodinách). Zvýšené hladiny ROS sa v bunkách prejavili najmä po 48 hodinách inkubácie, pričom najčastejšie boli detegované superoxidový radikál a peroxid vodíka po aplikácii všetkých troch silíc už od koncentrácie 0,3 μg.ml-1. Oxidácia lipidov bola najvýraznejšia (p<0,0001) po aplikácii litsea silice (30 μg.ml-1 po 24 hodinách), zatiaľ čo oxidácia proteínov dosiahla najvyššiu úroveň (p<0,001) po pridaní gaultériovej silice (0,3 μg.ml-1). Najvýraznejšie zvýšenie hladín BAX a p53 proteínu, ako aj zníženie proteínu Bcl 2, bolo zaznamenané po inkubácii buniek s gaultériovou silicou. V tejto práci boli preukázané antioxidačné, antimikrobiálne a cytotoxické účinky rastlinných silíc, ktoré by mohli byť využívané ako potenciálne antioxidačná, antimikrobiálne a protirakovinové činidlá. Author’s abstract: Plant essential oils are volatile secondary metabolites produced by various plants, primarily composed of terpenoids and phenylpropanoids. They exhibit a wide range of biological activities, including antioxidant, antimicrobial, and cytotoxic effects. This dissertation aimed to investigate the biological properties of selected plant essential oils. In the first step, the chemical composition of 10 essential oils was analyzed using gas chromatography and mass spectrometry. Antioxidant activity was assessed using the DPPH method, while antimicrobial activity was determined using the disk diffusion method and broth dilution test. Based on these results, three essential oils with the most promising effects were selected for further evaluation of their anticancer activity in the concentrations of 0,3; 3 and 30 μg/mL (for 24- and 48-hour incubation) by using MDA-MB-231 breast cancer cells in vitro. Cell viability was determined using the MTT assay, membrane integrity was assessed via CFDA/PI staining, mitochondrial membrane potential was evaluated using PI staining, and DNA fragmentation was determined by the TUNEL assay. Reactive oxygen species (ROS) were detected luminometrically and by using the NBT assay (superoxide radical), Amplex® Red kit (hydrogen peroxide), and APF kit (hydroxyl radical). Oxidative lipid damage was evaluated by measuring malondialdehyde levels, while protein oxidation was quantified by protein carbonyl content. Furthermore, Western blot analysis was used to detect the expression levels of p53, BAX, and Bcl-2 proteins. The results were statistically analyzed using GraphPad Prism software, employing the Shapiro-Wilk test and two-way analysis of variance (ANOVA). The main components identified in the essential oils were linalyl acetate and limonene (bergamot), δ cadinene and (Z) β farnesene (cedarwood), terpinene-4-ol and γ-terpinene (tea tree), 1,8-cineole and limonene (camphor), methyl salicylate (wintergreen), β-citronellol and geraniol (geranium), citral (lemongrass and litsea cubeba), 1,8-cineole and α-terpineol (niaouli), and linalyl acetate (petitgrain). The highest antioxidant activity was observed in lemongrass (84.0%) and cedarwood (81.1%) essential oils. Significant antimicrobial activity against the Gram-negative bacterium Pseudomonas aeruginosa was exhibited by lemongrass and litsea essential oils (inhibition zones of 34.67 mm and 30.00 mm, respectively). Salmonella enterica was sensitive to essential oils in the broth dilution assay. Among Gram-positive bacteria, wintergreen essential oil demonstrated the strongest inhibition, with inhibition zones of 12.67 mm and 11.67 mm against Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, respectively. The most effective essential oils against yeasts were tea tree, geranium, and wintergreen, all showing MIC values below 1 μL/mL. Among yeasts, Candida krusei was the most inhibited, with inhibition zones of 30.00 mm (litsea), 20.00 mm (cedarwood), and 19.96 mm (lemongrass). Based on these properties, three essential oils – wintergreen, lemongrass, and litsea were selected for further evaluation of their anticancer properties. Cell viability analysis revealed that wintergreen essential oil had the most pronounced effect (p<0.0001) at concentrations of 3 μg/mL (after 24 hours) and 0.3 μg/mL (after 48 hours). Membrane integrity was disrupted upon the addition of lemongrass and litsea essential oils at a concentration of 0.3 μg/mL in both time points (p<0.0001). Mitochondrial membrane potential was most affected by wintergreen (3 μg/mL at both time points) and litsea essential oils (3 μg/mL after 24 hours and 0.3 μg/mL after 48 hours). DNA integrity was primarily disrupted by litsea essential oil (30 μg/mL after 24 and 48 hours). Elevated ROS levels were predominantly observed after 48 hours of incubation, with superoxide radical and hydrogen peroxide being the most frequently detected ROS following the application of all three essential oils at concentrations as low as 0.3 μg/mL. Lipid oxidation was most pronounced (p<0.0001) after treatment with litsea essential oil (30 μg/mL at 24 hours), while protein oxidation reached its highest level (p<0.001) following wintergreen essential oil treatment (0.3 μg/mL). The most significant increase in BAX and p53 protein levels, along with a decrease in protein Bcl-2, was observed after incubation with wintergreen essential oil. This study demonstrated the antioxidant, antimicrobial, and cytotoxic effects of essential oils, suggesting their potential use as antioxidant, antimicrobial, and anticancer agents. Krajina Slovensko Jazyk dok. slovenčina URL http://opac.crzp.sk/openURL?crzpSigla=spunitra&crzpID=52180 Počet ex. 1, z toho voľných 0, prezenčne 1 Báza dát Kvalifikačné práce 
kniha
Signatúra Dislokácia Umiestnenie Voľné VP-100180 Štúrova - záverečné práce len prezenčne
Zdroj: Slovenská poľnohospodárska knižnica - Katalóg
Počet záznamov: 1